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產品內容：

100 μL Calcein AM, 2 mM in 無水 DMSO（200T） 

500 μL Calcein AM, 2 mM in 無水 DMSO（1000T） 

應用范圍：活細胞熒光示蹤探針

產品參數 

λEx/λEm (calcein) = 494/517 nm (pH 8) 

儲存條件 

本產品-20℃避光保存，推薦條件下可以保存 6 個月。

產品介紹 

Calcein , AM 是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑，它可以穿透細胞膜進入細胞，被細胞內的酯酶剪切 Calcein。Calcein 帶高度負電荷，可以被滯留在正常細胞的 胞質內，發出明亮的綠色熒光。由于其低毒性，Calcein , AM 可以用于研究細胞膜的完整性和長期細胞示蹤實驗。此外，它也可以被用于定量活細胞數。Calcein AM Cell Viability Assay 是在細胞活力檢測中，用來定量活細胞數的終點檢測法。試劑盒測定所產生的熒光信號與樣品中的活細胞數成正比（圖 1）。

圖 1. 用 Calcein AM Cell Viability Assay Kit 定量 HeLa 細胞 數。細胞在檢測前 24 h 接種于 96 孔板內。

使用方法 

1. Calcein , AM 工作液的配置 

 1. 從冷凍狀態下取出 Calcein , AM 儲存液原管，靜置 30 min 使其恢復至室溫。 

 2. 在 10 mL 的 PBS 中加入10 μL 的 2 mM Calcein, AM 儲存液，渦旋混勻，配置成 2 μM 的 Calcein, AM 工作液。 

注：Calcein, AM 工作液的推薦濃度為 0.1-10 μM，最佳使用濃度由具體的細胞類型決定。2 μM 的 Calcein, AM 工作液適用于以下類型的細胞：NIH3T3, PtK2, HeLa 和 MDCK。

2. 細胞活力檢測 

 1. 按實驗要求將細胞接種于 96 孔培養板，推薦使用黑色板壁的培養板用于熒光檢測。對于貼壁細胞，需在檢測前一天鋪板，并設定空白對照孔。 

 2. 根據實驗要求對細胞進行適當處理。 

 3. 吸除每孔培養液。

 注：培養基中的血清可能含有酯酶活性，會增強背景熒光。因而這一步操作中，可用 PBS 清洗細胞，以降低殘留血清的影響。 

 4. 每孔加入 100 μL 的 2 μM Calcein, AM 工作液。 

 5. 37℃孵育 30 min 或者更長時間。 

 6. 用激發波長為 485 nm，發射波長為 530 nm 的熒光檢測儀測量培養板內的熒光。

注意事項 

 Calcein , AM 遇到濕氣會分解，使用后請在-20℃下密閉冷凍保存，防止水分進入。